Penelitian ini dengan tujuan untuk mengetahui pengaruh kedalaman lapisan tanah asal dan dosis pupuk organik terhadap pertumbuhan bibit kelapa sawit di pre-nuresery, telah dilakukan di Kebun Pendidikan dan Penelitian (KP-2) Institut Pertanian Stiper, Desa Maguwharjo, Kecamatan Depok Yogyakarta pada bulan Januari – April 2017. Penelitian ini menggunakan metode percobaan faktorial yang disusun dalam rancangan ancak lengkap (RAL) yang terdiri dari 2 faktor perlakuan, faktor 1 yaitu kedalaman lapisan tanah asal yang terdiri dari tiga aras 0-20 cm, 20-40 cm, 40-60 cm dan faktor 2 yaitu dosis pupuk organik (% volume) yang terdiri dari lima aras 0%, 10%, 20%, 30% dan 40%. masing masing kombinasi perlakuan terdiri dari 3 ulangan, sehingga di butuhkan 3x5x3=45 tanaman. Data hasil penelitian dianalisis dengan sidik ragam pada jenjang 5%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat interaksi nyata antara kedalaman lapisan tanah asal dan dosis pupuk organik terhadap pertumbuhan bibit kelapa sawit di pre nursery pada berat kering tajuk. Pemberian dosis pupuk organik 40% dan media tanam yang berasal dari tanah sub soil kedalaman 20-40 cm menghasilkan berat kering tajuk yang sama baiknya dengan media tanam top siol kedalaman 0-20 cm. Tanah asal sub soil dengan kedalaman 20-40 cm dengan penambahan pupuk organik 40% dapat di gunakan sebagai media tanam pengganti tanah top soil kedalaman 0-20 cm.