Penelitian dengan tujuan untuk mengetahui pengaruh macam pupuk hayati dan komposisi media tanam terhadap pertumbuhan bibit kelapa sawit telah dilakukan di kebun pendidikan dan penelitian (KP2) Instiper Yogyakarta. Rancangan penelitian yang digunakan adalah percobaan faktorial yang diatur dalam Rancangan Acak Lengkap (CRD) yang terdiri dari dua faktor. Faktor pertama adalah aplikasi pupuk hayati yang terdiri dari 2 aras yaitu mengunakan mikoriza dan mikroba. Faktor kedua adalah komposisi media tanam yang terdiri 3 aras yaitu menggunakan media tanam tanah regosol, latosol, dan kompos dengan komposisi 2:1:1, 1:2:1, dan 1:1:2. Diperoleh 6 kombinasi perlakuan, setiap perlakuan diulang 4 kali, setiap ulangan terdiri dari 3 tanaman sehingga diperoleh bibit sebanyak = 72 bibit, data yang diperoleh dari masing-masing perlakuan dianalisis dengan sidik Ragam pada jenjang 5 % apabila terdapat perbedaan yang nyata, maka dilanjutkan dengan uji DMRT pada jenjang 5%. Hasil analisis menunjukkan bahwa komposisi media tanam regosos : latosol : kompos (2:1:1) menghasilkan pertumbuhan bibit tertinggi dibandingkan dengan perbandingan 1:2:1 dan 1:1:2. Aplikasi pupuk mikrobia dan mikoriza dapat menghasilkan pertumbuhan bibit kelapa sawit di pre nursery.