Campuran minyak sawit merah (Red Palm Oil/RPO) dan minyak inti sawit (Palm Kernel Oil/PKO) berpotensi digunakan sebagai bahan baku biodiesel karena memiliki karakteristik asam lemak yang berbeda dan saling melengkapi. Kualitas biodiesel yang dihasilkan dipengaruhi oleh komposisi campuran minyak dan kondisi proses transesterifikasi, terutama suhu reaksi yang digunakan. Oleh karena itu, perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui pengaruh variasi suhu transesterifikasi dan rasio campuran minyak terhadap kualitas biodiesel yang dihasilkan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh variasi suhu transesterifikasi dan perbandingan campuran minyak sawit merah (Red Palm Oil/RPO) dengan minyak inti sawit (Palm Kernel Oil/PKO) terhadap kualitas biodiesel yang dihasilkan. Penelitian menggunakan metode eksperimen dengan Rancangan Blok Lengkap (RBL) dua faktor, yaitu variasi suhu transesterifikasi 55°C, 60°C, dan 65°C serta variasi rasio campuran RPO:PKO sebesar 80:20, 50:50, dan 20:80 dengan dua kali ulangan. Parameter yang dianalisis meliputi kadar air, angka asam, dan viskositas biodiesel. Data dianalisis menggunakan analisis keragaman (ANOVA) dan uji lanjut Duncan pada taraf signifikansi 5%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa variasi suhu transesterifikasi, rasio campuran minyak, dan interaksi keduanya berpengaruh sangat nyata terhadap kadar air dan angka asam biodiesel (P<0,01). Kadar air terendah diperoleh pada perlakuan A3B2 (65°C; 50:50) sebesar 0,5783%, sedangkan angka asam terendah diperoleh pada perlakuan A3B3 (65°C; 20:80) sebesar 0,4112 mg KOH/g. Berdasarkan SNI 7182:2015, nilai angka asam telah memenuhi standar maksimum sebesar 0,50 mg KOH/g, sedangkan kadar air belum memenuhi standar maksimum sebesar 0,05%. Analisis statistik terhadap parameter viskositas tidak dapat dilakukan karena terdapat beberapa data hasil pengujian yang tidak terbaca. Secara umum, suhu transesterifikasi 65°C menghasilkan karakteristik biodiesel yang lebih baik dibandingkan suhu lainnya, sedangkan kombinasi rasio campuran RPO dan PKO memengaruhi kualitas biodiesel yang dihasilkan.