Penelitian bertujuan untuk mengetahui cara aplikasi dan konsentrasi eco enzyme terhadap pertumbuhan bibit kelapa sawit pre nursery. Penelitian dilaksanakan di KP2 Institut Pertanian Stiper Yogyakarta yang terletak di Desa Wedomartani, Kecamatan Ngemplak, Kabupaten Sleman, Provinsi Daerah Istimewa Yogyakarta pada tanggal 1 Maret sampai 23 mei 2022. Penelitian ini dilakukan menggunakan percobaan dengan rancangan split plot, terdiri dari 2 faktor yang disusun dengan rancangan acak lengkap (RAL). Faktor I adalah cara aplikasi terdiri 2 macam yaitu disiram dan disemprot. Faktor II adalah konsentrasi eco enzyme yang terdiri dari 4 macam yaitu kontrol (NPK 0,2 gram), eco enzyme 1%, eco enzyme 3%, eco enzyme 5%. Dari kedua faktor tersebut terdapat 8 kombinasi dan masing – masing perlakuan diulang sebanyak 5 kali dan didapat 40 satuan percobaan. Data hasil penelitian dianalisis menggunakan sidik ragam (Analisis of Variance) dengan jenjang nyata 5 % dan di uji lanjut dengan uji DMRT jenjang 5%. Hasil penelitian menunjukkan tidak ada interaksi nyata antara cara aplikasi dan konsentrasi eco enzyme terhadap pertumbuhan bibit kelapa sawit pre nursery. Kosentrasi eco enzyme menghasilkan pertumbuhan yang sama pada parameter diameter batang, jumlah daun, volume akar, berat segar akar, berat kering akar, berat segar tanaman, berat kering tanaman. Cara aplikasi menghasilkan pertumbuhan yang sama pada bibit kelapa sawit pre nursery. Konsentrasi kontrol (NPK 0,2 gram) menunjukkan berpengaruh nyata terhadap parameter tinggi tanaman bibit kelapa sawit pre nursery.