Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh macam pupuk organik di lapisan tanah yang berbeda terhadap pertumbuhan bibit kelapa sawit main nursery pada tanah regosol. Penelitian ini dilaksanakan di KP2 Maguwoharjo Institut Pertanian Stiper Yogyakarta pada bulan Januari s/d April 2026. Penelitian ini menggunakan rancangan percobaan faktorial rancangan acak lengkap (RAL) yang terdiri dari dua faktor. Faktor 1 adalah : macam pupuk organik yang terdiri dari 3 macam yaitu pupuk kandang ayam , azolla, dan pupuk kompos limbah pasar. Faktor kedua adalah lapisan tanah yang terdiri dari 3 lapisan, yaitu 0-20 cm, 20-40 cm, dan 40-60 cm. Hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat interaksi nyata antara macam pupuk organik pada lapisan tanah terhadap berat segar akar, berat kering akar, dan volume akar bibit kelapa sawit main nursery. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian pupuk organik azolla memberikan pengaruh nyata terhadap panjang akar dan luas daun bibit kelapa sawit main nursery. Hasil analisis menunjukkan bahwa penggunaan lapisan tanah pada kedalaman 0-20 cm, 20-40 cm, dan 40-60 cm berpengaruh sama terhadap pertumbuhan bibit kelapa sawit di main nursery